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1.背 景 猪流行性腹泻ped疫苗品种多,专家推荐的免疫方案各不相同甚至完全相反,猪场如何正确开展免疫?免疫效果如何判断?一直是养猪业的行业困局,也成为该病常年在国内流行的重要原因。直接检测初乳中的分泌型siga, 能够较好的解决以上问题,但由于采集初乳不方便且试剂盒检测阳性判定标准与生产实际不符合,检测费用高等原因,方法仅仅停留在研究机构内使用,无法真正为猪场所用。因此,行业亟需对免疫效果及免疫程序做出评价的方便、可靠的方法。 2.粪便中ped病毒载量的检测 sybr green i 荧光定量pcr方法检测粪便中ped病毒载量,针对流行性腹泻病毒n基因进行分子生物学设计,比常规的rt-pcr方法灵密度高100倍。该方法应用于临床可以用于以下场合: a.预警猪场是否可能爆发流行性腹泻。 b.预测可能的传播途径,指示猪场发生母猪传播或肉猪传播的可能性。 c.监测疫苗使用效果, 辅助调整免疫程序。 d.环境清洗消毒效果评价。 3.标准采样流程 本检测方法采样非常简便。使用无菌棉签伸到猪的肛门内侧刮取新鲜粪便,用封口袋或试管装好,密封,做好记号,随即加冰袋装箱寄送。样品最好当天或次日送达。
4.采样标准: 以1000头生产母猪为例: 5.送样注意事项 要求:低温、快速、信息明确、提前沟通 注意事项: 1.发样前,提前联系接收人员,确保样品信息明确。 2.确保过程低温,快递送样建议使用顺丰当日达服务,保证样品的可用性。 6.检测结果判定 病毒拷贝数低于103认为阴性,103-104认为弱阳性,大于104 判定为阳性。弱阳性群体需要引起注意,阳性群体具有发病的可能性。 7.猪场检测实例 a.某ped正在发病猪场各个猪群病毒载量分布及占比 检测发现,该猪场哺乳仔猪粪便病毒载量高,显示出正在发病的病毒载量分布。育肥猪和保育猪也有高病毒载量样品,提示该场发病可能是从育肥猪向哺乳仔猪传播。该猪场ped的控制着重于采用生物安全的方法比如设立育肥舍与哺乳舍之间的消毒池以及人员的流动控制等措施,结合母猪群体免疫最后得到有效控制。 b.某ped康复猪场各个猪群病毒载量分布及占比 该猪场2017年10-12月份连续发病两次,检测在第二次发病康复后1个月进行,发现该猪场母猪群体由于感染发病后抗体水平高,粪便中病毒载量很低;哺乳仔猪及保育猪仅有少量的弱阳性猪存在,而育肥猪粪便病毒载量也很低,可以预计该场今后一段时间不再容易发生ped感染。实际该猪场到2018年11月份没有再发ped。 c.某ped未发病猪场各个猪群病毒载量分布及占比 该猪场2017年春季发病,2017年秋季采取加强免疫等方法,到2018年3月份没有发生ped。检测发现其育肥猪群病毒载量低,哺乳及保育猪群病毒载量也不高,但哺乳母猪及怀孕母猪存在较高比例的阳性率和弱阳性率,提示该场存在母猪传播发病的风险。于是建议该猪场3月份时再次用ped疫苗进行全群普免一次,直到2018年11月份,没有发生ped流行。 d. 某常年发病猪场清洗消毒过后哺乳猪舍舍面病毒载量检测 某猪场常年ped发病,冬季流行严重。现场考察发现其哺乳舍使用木质保温箱,保温箱年久破损,积存粪渣,同时保温箱内清洗消毒不彻底,存在粪渣和消毒死角。2018年6月检测发现残留的粪渣仍然含有高水平的ped病毒,是该场常年持续发病的重要原因。通过加强清洗消毒,不留死角,增加熏蒸消毒等措施,2018年7月底以后猪群测定没有再发ped。 检测是解决问题的第一步,中科基因从猪场实际需求出发,提供以下金牌服务,帮助猪场彻底解决哺乳仔猪拉稀问题。
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